Elizabeth Banks a fait des études de théâtre à l'American Conservatory Theater's Advanced Trainig Program. Elle ressort diplômée de l'école en 1998, année où elle joue également dans son premier film, Surrender Dorothy, de Kevin DiNovis.En 2000, elle obtient un petit rôle dans le remake de Shaft avec Samuel L. Jackson, mais c'est aux côtés de Tobey Maguire qu'elle va connaître ses premiers succès, puisqu'elle interprète Betty Brant dans Spider-Man de Sam Raimi et le retrouve l'année d'après à l'affiche de Pur Sang, la légende de Seabiscuit. Elle reprend son rôle de journaliste dans les opus deux et trois de Spider-Man et apparaît également dans la série Scrubs.Parallèlement, elle enchaîne les comédies, avec 40 ans, toujours puceau avec Steve Carell, Frère Noël avec Vince Vaughn et Paul Giamatti , puis Appelez-moi Dave avec Eddie Murphy en 2008. La même année, elle est Laura Bush dans le prochain film d'Oliver Stone, W - L'improbable président, biopic très attendu sur l'ancien président des Etats-Unis George W. Bush. Son goût pour la comédie se prononce avec sa participation dans Les Grands frères, avec Paul Rudd et Seann William Scott, mais aussi dans la comédie loufoque Zack & Miri font un porno de Kevin Smith dans lequel elle forme un couple avec Seth Rogen, à qui elle avait déjà donné la réplique dans 40 ans, toujours puceau. Mais l'actrice joue également dans un registre plus dramatique, en témoigne ses prestations dans les thriller Les Intrus (2009) et Les Trois prochains jours réalisé par Paul Haggis (2010).
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